Yeast one-Hybrid System

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Das Yeast-1-Hybrid-System (Hefe 1-Hybrid System) dient zur Aufklärung von Protein-DNA-Interaktion, beziehungsweise potentiell DNA-bindende Protein, unter anderem Transkriptionsfaktoren, für eine definierte DNA-Sequenz zu ermittel. Untersucht werden können beispielsweise DNA-Bibliotheken. Die DNA-Sequenz, die untersucht werden soll (Köder-Sequenz), wird zunächst stabil in einen geeigneten Hefestamm eingebracht der über geeignete Reportergene verfügt. In der Regel wird die Köder-Sequenz in mehreren Kopien in das Genom der Hefe eingebracht. Die Hefe-Klone werden anschließend mit dem Protein, welches untersucht werden soll, transformiert. Das untersuchte Protein wird als Fusionsprotein eingebracht, mit einer dem Reportergen entsprechenden Aktivierungsdomäne. Die Untersuchung erfolgt mit einem entsprechenden Selektivmedium, da nur Kolonien erhalten werden falls eine Interaktion stattgefunden hat.


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